Proliferación de células madres mesenquimales obtenidas de tejido gingival humano sobre una matriz de quitosano: estudio in vitro

Abstract

Objetivo: Comprobar la proliferaci�n de c�lulas madres mesenquimales (MSCs) provenientes de tejido conjuntivo gingival humano sobre una matriz de quitosano. M�todo: Estudio experimental in vitro en el cual se aislaron MSCs a partir de cultivos por explante de tejido conjuntivo gingival. La presencia de MSCs, se caracteriz� mediante citometr�a de flujo, utilizando para ello anticuerpos CD34, CD45, CD73, CD90, CD105, diferenciaci�n hacia tres linajes celulares: adipocitos, osteoblastos y condroblastos. La diferenciaci�n fue corroborada mediante microscop�a �ptica con tinciones Oil Red, Alizarin Red y Safranina O respectivamente. La matriz de quitosano fue analizada mediante microscop�a �ptica. Las MSCs en pasaje 5, fueron sembradas en presencia de la matriz de quitosano. La proliferaci�n de las c�lulas madres fue analizada mediante microscop�a �ptica y tinci�n con cristal violeta. Resultados: A partir del explante de tejido gingival humano se obtuvieron MSCs, que cumplieron con los criterios de caracterizaci�n morfol�gica y fenot�pica correspondiente a una MSC. Las MSC adoptaron una morfolog�a fibroblastoide, adherencia al pl�stico, confluencia de un 80 por ciento y sobre un 90 por ciento expresaron los marcadores CD73, CD90 y CD105 y bajo un 10 por ciento fueron negativas para CD34, y CD45 por t�cnica de citometria de flujo. Las MSC cultivadas en presencia de quitosano proliferan, sin embargo observamos que a mayor concentraci�n de quitosano en el cultivo disminuye la proliferaci�n y densidad celular. La matriz de quitosano en presencia del medio de cultivo pierde sus propiedades f�sicas, disolvi�ndose y formando un gel no transportable. Conclusiones: A pesar de existir proliferaci�n celular de MSCs de origen gingival humano en presencia de la matriz de quitosano, su utilidad como andamiaje y medio de transporte de MSC es deficiente debido a que se alteran sus propiedades f�sicas, disolvi�ndose y formando un gel no transportable en contacto con el medio de...^ies