Isolation and characterization of Streptococcus spp. group B in Nile tilapias (Oreochromis niloticus) reared in hapas nets and earth nurseries in the northern region of Parana State, Brazil

Abstract

The objective of this study was to isolate and characterize Streptococcus spp. in Nile tilapias (Oreochromis niloticus) reared in net-pens and earth nurseries. Eight intensive tilapia-rearing farms were investigated in north Paraná, Brazil from April 1st 2001 to April 30th 2002. The fish were reared in a system of hapas nets on four farms and in earth nurseries on other four farms. A total of 370 samples were analyzed of material collected from 120 fish (brain, liver, kidney, skin scrapes, ascites liquid and eye) that were sown on BHI agar (Brain Heart Infusion) supplemented with 1% yeast extract and sheep blood. Streptococcus spp. was isolated in 36 of the samples (18 brain, eight liver, eight kidney and two ascites liquid) from 25 fish. Streptococci were isolated in both systems, almost in the same proportion. First the streptococci were characterized by the catalase and esculin test, growth in methylene blue and sodium chloride at 6.5%. They were classified in groups by the Slidex Strepto-Kit (BioMerieux, France). The phenotypic characteristics were determined by the Api 20 Strep microtest system (BioMerieux, France). The 36 Streptococcus spp. samples did not present hemolysis and were classified as Lancefield group B. Further 16 samples were identified as Streptococcus agalactiae and 20 were not identified by the Api 20 Strep, but presented the same biochemical profile described for the reference strain of Streptococcus difficile (ND-2-22).O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar o Streptococcus spp. em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas em sistema de tanque rede e em viveiros de terra. Oito propriedades de criação intensiva foram estudadas de 1 de abril de 2001 a 30 de abril de 2002. Em quatro propriedades, os peixes eram cultivados em sistema de tanque rede e em quatro em sistema de tanque terra. Ao todo foram analisadas 370 amostras de material colhido de 120 peixes (encéfalo, fígado, rim, raspado de pele, líquido ascítico e olho) que foram semeadas em ágar BHI (Brain Heart Infusion) contendo sangue ovino e extrato de levedura. Streptococcus spp. foi isolado de 36 amostras (18 amostras de encéfalo, oito de fígado, oito de rim e duas de líquido ascítico), provenientes de 25 peixes. Estreptococos foram isolados, quase na mesma proporção, nos dois sistemas de cultivo. Inicialmente os estreptococos foram caracterizados pela prova da catalase e esculina, crescimento em azul de metileno e NaCl a 6.5%. A classificação em grupos foi efetuada pelo Slidex Strepto-Kit (BioMerieux, França). As características fenotípicas foram determinadas pelo sistema de microtestes API 20 Strep (BioMerieux, França). As 36 amostras de estreptococos não apresentaram hemólise e foram classificadas no grupo B de Lancefield. Dessas, 16 amostras foram identificadas como Streptococcus agalactiae e 20 não foram caracterizadas pelo API 20 Strep, mas apresentaram o mesmo perfil bioquímico descrito para a cepa de referência de Streptococcus difficile (ND-2-22). A ausência de hemólise, classificação no grupo B e o perfil bioquímico sugerem que estes estreptococos podem pertencer à espécie Styreptococcus difficile.