Características parcial del gen B-Galactosidasa de Bacillus sp. Msp7 aislado de las salinas de Pilluana, San Martín - Perú

Abstract

Las β-galactosidasas (EC.3.2.1.23) son glicosil hidrolasas que catalizan principalmente la hidrólisis de β-D-galactósidos, son producidas por diversos tipos de microorganismos y de interés en la síntesis de oligosacáridos. Una de las fuentes potenciales para la obtención de enzimas que cumplan estas características son los microorganismos aislados de ambientes extremos como las salinas. En este estudio, se clonó y caracterizó parcialmente el gen β-galactosidasa de Bacillus sp. MSP7, aislado de las salinas de Pilluana (San Martín), Perú, el cual presentó actividad enzimática de 65 U/mg de células secas, mayor que otras cuatro cepas de Bacillus sp. aisladas del mismo lugar. Con este fin, el gen en cuestión se amplificó mediante la reacción en cadena de la polimerasa usando cebadores específicos, obteniéndose un amplicón de aproximadamente 2000 pb; el producto se purificó y unió al vector pUC19, utilizando Escherichia coli JM109; los clones recombinantes fueron secuenciados parcialmente. Las secuencias nucleotídicas y aminoacídicas se analizaron mediante herramientas bioinformáticas, tales como Blast, Clustal y Mega. La secuencia nucleotídica de 957 pb correspondiente al gen β-galactosidasa de Bacillus sp MSP7, presentó 98% de similitud con el de Bacillus licheniformis ATCC 14580 (DSM 13) y a nivel aminoacídico, mostró 99% de similitud con las mismas cepas. La proteína pertenece a la familia GH 42.