Reverse-phase HPLC analysis of goat caseins. Identification of α s1 and α S2 genetic variants

Abstract

Separation of caprine asr, a S 2-' 13-and x-caselns was achieved by a simple and reliable HPLC method, using a reverse-phase C4 column and water/acetonitrilelTFA as solven!. Identification of the fractions separated by this method was performed by both alkaline PAGE and SOS-PAGE, and confirmed by analyses of purified casein fractions, prepared using cation-exchange chromatography. Analysis of individual milk from goats homozygous at the a s '-and aS2-Cnloci revealed that most of the asrcasein variants (A, B, C, D, F) and the null phenotype, as weil as a s2-casein variants A and B are distinguishable. In addition, our method permits the separation of caseinomacropeptide and para x-caseln, goat milk 1 casein 1 chromatography 1 genetic variant 1 RP-HPLC Résumé-Analyse des caséines caprines par HPLC en phase inverse. Identification des variants génétiques des caséines as, et a s 2. La séparation des caséines caprines as" a s 2' 13 et K a été obtenue par une méthode de HPLC simple et fiable, à l'aide d'une colonne de phase inverse C4 et d'Un système de solvants eau/acétonitrilelTFA. L'identification des fractions séparées par cette méthode a été effectuée par électrophorèse en gel de polyacrylamide à pH alcalin et par électropho-rèse en gel de polyacrylamide en présence de SOS, et confirmée par les analyses de caséines puri-fiées, préparées par chromatographie d'échange de cations. L'analyse de laits individuels de chèvres homozygotes aux loci a s '-et aS2-Cna démontré que la plupart des variants (A, B, C, D, F) et le phénotype nul de la caséine as' peuvent être distingués, ainsi que les variants A et B de la ca-séine a s 2. En outre, notre méthode permet la séparation du caséinomacropeptide et de la para ca-séine K. lait de chèvre / caséine / chromatographie / variant génétique / HPLC en phase inverse 236