Efeito de frações parcialmente purificadas de Saccharomyces cerevisiae na germinação de conídios e formação de apressórios por Colletotrichum sublineolum e Colletotrichum lagenarium

Abstract

O trabalho teve por objetivo verificar o efeito de preparações ou de frações parcialmente purificadas obtidas de S. cerevisiae, autoclavada por 4 horas seqüencialmente, submetidas à cromatografia de troca iônica (CTI) utilizando tampão Tris-HCl ou bicarbonato de amônio, na germinação de esporos (GE) e formação de apressórios (FA) in vitro por C. lagenarium ou C. sublineolum. Para isto, 40 µL de cada preparação ou fração foram colocados em pocinhos de placa de ELISA, juntamente com 40 µL de uma suspensão de esporos (1 x 10(5) conídios/mL) de C. lagenarium ou de C. sublineolum. Após incubação, determinou-se GE e FA. Água destilada esterilizada foi utilizada como controle. Todas as preparações da levedura autoclavada promoveram estímulo da GE, sem a formação de apressórios por ambos os fitopatógenos. Frações provenientes da CTI, com tampão Tris-HCl, induziram a GE por C. sublineolum e C. lagenarium. Na FA de C. lagenarium houve estímulo pelas frações IV, V e VI, sem diferença, no entanto, na FA de C. sublineolum. Para as frações obtidas por CTI, utilizando tampão bicarbonato de amônio, houve estímulo da GE por C. lagenarium nas frações I e IV e efeito inibitório da germinação pelas frações V, VI e VII. Não houve FA na fração I e as demais frações apresentaram efeito inibitório da FA por C. lagenarium. As frações I e II estimularam a GE e a FA por C. sublineolum e demais frações apresentaram efeito inibitório. Assim, evidencia-se a importância da escolha de tampões no processo de purificação de frações de S. cerevisiae, o que pode resultar em frações que estimulem a germinação de esporos de fitopatógenos fúngicos ou em frações com atividade inibitória da germinação, podendo contribuir futuramente no controle de doenças causadas por esses fungos.The objective of this study was to verify the effect of preparations or fractions partially purified from S. cerevisiae, autoclavad for 4 hours sequentialy, submitted to ion-exchange chromatography (IEC), using Tris-HCl or ammonium bicarbonate buffers, on the in vitro conidium germination (CG) and appressorium formation (AF) of C. lagenarium and C. sublineolum. A total of 40 µL of each preparation or fraction was placed inside the wells of ELISA plates with 40 µL of a spore suspension (1 x 10(5) conidia/mL) of C. lagenarium or C. sublineolum. After incubation, CG and AF were determined. Distilled water was used as control. All the preparations from the autoclavad yeast stimulated CG, without AF for both pathogens. Fractions from IEC, with Tris-HCl buffer, induced CG for C. sublineolum and C. lagenarium. For AF by C. lagenarium there was a stimulus by the fractions IV, V and VI without difference in AF by C. sublineolum. With the fractions obtained by IEC, using ammonium bicarbonate buffer, there was a stimulation of CG by C. lagenarium by the fractions I and IV and an inhibitory effect of the germination by the fractions V, VI and VII. There was no AF in the presence of fraction I and the other fractions exhibited inhibitory effect on AF by C. lagenarium. The fractions I and II stimulated CG and AF by C. sublineolum and other fractions presented inhibitory effect. Thus, it was showed the importance to select specific buffers during the purification of fractions of S. cerevisiae. This can result in fractions that stimulate CG and AF of these pathogens or in fractions with inhibitory activity on conidium germination that can contribute to control dispasps caused by these pathogens.