APROVEITAMENTO DA ÁGUA DE MACERAÇÃO DE MILHO PARA PRODUÇÃO DE COMPOSTOS BIOATIVOS POR ASPERGILLUS NIGER (UCP/WFCC 1261)

Abstract

O objetivo da presente proposta foi avaliar a produção de glicosamina, ácido citrico, enzimas ligninolíticas, protease e polifosfato por um isolado de Aspergillus niger obtido do solo da caatinga, em resposta à presença da água de maceração do milho, “corn steep liquor”, um subproduto da cadeia produtiva do milho, que atua como fonte de nitrogênio para crescimento microbiano. Os efeitos da presença do metanol no meio de cultura foram também avaliados. O fungo foi cultivado em meio glicose-peptona, como controle, e em meio contendo água de maceração em substituição à peptona, a 150 rpm, a 30 ºC durante 168 horas. Amostras foram coletadas a intervalos de 24 horas. O sobrenadante da cultura foi separado por centrifugação a 10.000 x g a 4 ºC. A biomassa foi utilizada para determinação da biomassa por peso seco, glucosamina, polifosfato e estudo morfológico sob a microscopia de luz. O sobrenadante foi utilizado para a determinação de ácido cítrico, celulase, celobiase (β-glicosidase), exoglucanase, xilanase e protease. Os ensaios foram realizados em cinco réplicas, e os resultados apresentados como média dos dados obtidos. Os resultados foram avaliados empregando-se a análise de variância e as diferenças significativas entre as médias (p ≤ 0,05) determinadas pelo teste de Tukey, com auxílio do software STATISTIC 7.0 . Os resultados obtidos revelaram os efeitos significativos do subproduto sobre a produção dos bioativos avaliados. Um conteúdo de glicosamina de 4,68 g g-1 de biomassa seca foi obtido para o crescimento em CSL mais metanol, comparado a 2,36 g g-1 para as culturas controle crescidas em glicose e peptona mais metanol. Um rendimento de ácido citrico de 2,32 g L-1 foi determinado para células cultivadas na presença de CSL/metanol, comparado a 1,54 g L-1 para células cultivadas em meio contendo glicose, peptona e metanol. A presença do metanol 1,5 % no meio de cultura aumentou o conteúdo dos compostos de forma significativa. Atividades correspondentes a 0,996 U mL-1, 0,488 U mL-1 e 0,52 U mL-1 foram determinadas para celulase, celobiase e exoglucanase, respectivamente, para as células cultivadas em meio CSL, comparado a 0,758 U mL-1, 0,342 U mL-1 e 0,40 U mL-1 para as células crescidas em glicose peptona. Para a xilanase, atividades de 45,27 U mL-1 e 39,99 U mL-1 foram determinadas para CSL e glicose peptona, respectivamente. Os dados revelaram que o crescimento celular em metanol resultou na redução da atividade das enzimas ligninolíticas. Atividades de 3,86 U mL-1 e 2,53 U mL-1 foram obtidas para as proteases nos cultivos em CSL e glicose e peptona mais metanol, respectivamente. Foi observado um aumento no conteúdo do polifosfato durante 96 horas de cultivo. Após esse período, o conteúdo do polímero diminuiu, indicando sua degradação nas condições testadas. Esse estudo também revelou que as células cultivadas na presença de CSL e metanol apresentaram alterações morfológicas. O isolado mostra-se útil para estudos contínuos na busca pela otimização da produção dos compostos bioativos avaliados. Os resultados podem ser valiosos para subsidiar o entendimento do comportamento celular frente a modificações e consequentemente no desenvolvimento de processos de produção mais eficientes e na redução de custos.