Isolamento, caracterização cultural-morfológica, patogenicidade e serologia de Streptomyces spp. da batata

Abstract

O presente trabalho testou quatro métodos de isolamento de Streptomyces spp. em tubérculos de batata (Solanum tuberosum) com sarna comum, superficial e profunda, caracterizando os isolados quanto a morfologia, serologia e patogenicidade. Para o isolamento foram testados: meio de cultura ágar-água a pH 10; meio contendo antibióticos; meio de asparagina e meio de quitina. O meio ágar-água pH 10 foi o mais eficaz no isolamento de Streptomyces spp. com média de 129 colônias/placa, além de ser de fácil preparo, menor custo e proporcionar melhor visualização das colônias. No meio de antibiótico verificou-se média de 54% dos fragmentos de tubérculos plaqueados com crescimento de Streptomyces spp. Já nos meios de asparagina e quitina a média foi de 36,3 e 2,5 colônias/placa, respectivamente. Para caracterização dos isolados obtidos utilizou-se o meio de extrato de levedura e malte. As colônias originadas apresentaram coloração que variou de cinza a marrom e de branco a creme, com ou sem produção de pigmento, com cadeias de esporos flexuosas ou espiraladas, de tamanho variável e produzindo ou não micélio aéreo em colônias com cadeias espiraladas. Dezenove isolados, representando esses diferentes tipos, foram inoculados na batata cv. Monalisa por infestação de solo autoclavado, antes da semeadura dos tubérculos-sementes. Sintomas típicos da doença foram verificados 14 semanas após a inoculação, para oito isolados. Anti-soros produzidos em coelhos contra três isolados fitopatogênicos apresentaram reação serológica (dupla difusão em gel-ágar de Ouchterlony) para os antígenos homólogos e para poucos antígenos heterólogos, porém os isolados de Streptomyces com patogenicidade confirmada não apresentaram antígenos em comum.Four methods of isolation of common superficial and deep scab were tested with the purpose of characterizing the isolates of Streptomyces scabies according to morphological and serological criteria and their pathogenicity. For isolation, obtained in water-agar at pH 10, a medium containing antibiotics, asparagine medium and coloidal quitin medium were tested. Water-agar pH 10 was the most efficient medium, giving rise to 129 colonies/Petri dishes, besides being of easy preparation, lower cost and giving better visualization of the colonies. The antibiotic medium gave an average of 54% of plated potato tuber fragments that yielded Streptomyces spp. growth. Asparagine and coloidal quitin showed averages of 36,3 and 2,5 colonies/Petri dish, respectively. For characterization of isolates, the yeast extract and malt medium were used, resulting in colony colors ranging from gray to brown and from white to cream, with and without production of pigment. The colonies formed flexuous or spiral spore chains, with variable size and producing or not aerial mycelium in spiral colonies. Nineteen isolates representing the different cultural and morphological types were inoculated in potato (Solanum tuberorum) cv. Monalisa through infestation of sterilized soil before the sowing of the seed tubers. Typical symptoms of the disease were reproduced 14 weeks after inoculation by eight isolates. Antisera produced in rabbits against three pathogenic isolates showed serological reaction (double diffusion in Ouchterlony gel-agar) for the homologous antigens and for few heterologous antigens. Streptomyces spp. isolates with confirmed pathogenicity did not show antigens in common.