Efecto tóxico de proteínas Cry1 de Bacillus thuringiensis sobre larvas de Tecia solanivora (Lepidoptera: Gelechiidae)

Abstract

La polilla guatemalteca de la papa Tecia solanivora Povolny se ha convertido desde mediados de la década pasada en una de las principales plagas que afectan los cultivos de papa en Colombia. Las estrategias de control de este insecto han involucrado, principalmente, el empleo de insecticidas químicos y en algunos casos métodos alternativos de control biológico y de prácticas culturales. El empleo de entomopatógenos como Baci/lus thuringiensis y baculovirus presentan gran potencialidad para ser involucrados en programas de manejo integrado de T. solanivora. Algunos trabajos anteriores han evaluado el potencial de cepas nativas de B. thuringiensis para controlar esta plaga, sin embargo, aún no se han identificado cuál o cuáles proteínas Cry poseen actividad tóxica específica para la polilla guatemalteca de la papa. En el presente trabajo se analizó la actividad tóxica individual de las proteínas CrylAa, Cry1Ab, CrylAc, CrylBa, CrylCa, CrylDa y Cry lEa de B. thurinqiensls, en larvas de primer ínstar de T. solanwora empleando dieta natural como alimento. Se diseñó simultáneamente un método e bioensayo sencillo, que requiriera cantidades bajas de proteína y que garantizara su reproducibilidad. Las proteínas se evaluaron en concentración de 4 µg/cm2, que correspondió a la CL50 de la cepa HDl, incluida como control positivo en los bloensayos, Los resultados obtenidos indicaron una toxicidad mayor de la proteína CrylAc respecto de las demás proteínas evaluadas; se obtuvo un porcentaje de mortalidad promedio cercano al 20% con dicha proteína, mientras que los porcentajes de mortalidad con las demás proteínas no superaron el 7%. Con el fin de confirmar los resultados obtenidos, se realizaron bioensayos con la cepa HD73, la cual posee únicamente los genes CrylAc y Cry2A y la cepa recombinante de E. coli que posee el gen Cry2A. Como se esperaba, los resultados indicaron una actividad tóxica alta de la cepa HD73 y baja de la proteína Cry2A, obteniéndose mortalidades superiores al 70% y menores del 10%, respectivamente. Lo anterior evidenciaría que la proteína CrylAc presenta actividad tóxica específica contra T. solanivora; sin embargo, parece que la interacción con otras proteínas Cryl ocasiona una mayor toxicidad de dicha proteína, teniendo en cuenta los mayores porcentajes de mortalidad promedio respecto de la proteína individual, observados con las cepas HDl e HD73, en las cuales la proteína Cry lAc se encuentra en combinación con otras proteínas Cryl.