Isolasi, Karakterisasi, dan Identifikasi Bakteri Endofit Sargassum polycystum Penghasil Enzim Alginat Lyase

Abstract

Alginate, polysaccharide from marine brown algae, is widely used for antitumor, anti-inflammatory, and also antiviral. However, alginate has large molecular weight that difficult to digest in some organsims. Therefore, it is important to look for the alginate lyase enzyme to break down the alginate. The purpose of this study was to obtain bacterial isolates that produce alginate lyase enzymes from Sargassum polycystum. Isolation of alginate lyase-producing bacteria was carried out by collecting Sargassum polycystum. from Sebalang Beach, Tarahan, South Lampung then the bacteria were isolated by the dilution method. The colonies obtained were purified and selected using qualitative (clear zone) and semi-quantitative activity tests, and identified morphologically, biochemically and molecularly using the 16S-rDNA gene. In this study, 20 pure bacterial isolates were obtained with one isolate having alginate lyase activity, namely PTF and PTH. The results of biochemical tests and molecular characterization showed that the isolate was Bacillus cereus.Alginat, polisakarida dari alga cokelat laut, banyak dimanfaatkan untuk antitumor, antiinflamasi, dan juga antivirus. Namun, alginat memiliki berat molekul yang besar yang membuatnya sulit dicerna oleh beberapa organsime. Oleh akrena itu, penting untuk mencari enzim alginate lyase untuk memotong alginate secara enzimatis. Tujuan penelitian ini adalah mendapatkan isolat bakteri yang menghasilkan enzim alginat lyase dari Sargassum polycystum. Isolasi bakteri penghasil alginat lyase dilakukan dengan mengkoleksi rumput laut Sargassum polycystum. dari Pantai Sebalang, Tarahan, Lampung Selatan kemudian bakteri diisolasi dengan metode pengenceran. Koloni yang didapat dimurnikan dan diseleksi dengan menggunakan uji aktivitas Aktivitas alginat lyase ditandai dengan adanya zona bening di sekitar koloni setelah ditetesi dengan larutan 10% setil piridinium klorida, serta diidentifikasi secara morfologi, biokimia dan molekuler menggunakan gen 16S-rDNA. Pada penelitian ini diperoleh empat isolat yang mempunyai aktivitas alginat lyase, yaitu PTF, PTE, PTH dan PTG dengan indeks alginolitik tertinggi adalah isolat PTF dan PTH. Hasil uji biokimia dan karakterisasi secara molekuler menunjukkan isolat PTH dan PTF memiliki kemiripan dengan jenis bakteri Bacillus cereus.