Produksi dan Karakterisasi Xilanase dari Isolat Bakteri M-13.2a Asal Air Laut Manado

Abstract

Diterima: 21 Agustus 2012, Disetujui: 13 Maret 2013 ABSTRAK Isolat bakteri M-13.2A yang berasal dari laut Manado diketahui mampu menghasilkan enzim selulase dan xilanase, berdasarkan pembentukan zona bening pada media padat. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan informasi lebih lanjut mengenai produksi dan sifat enzim xilanase yang dihasilkan dari isolat bakteri M-13.2A serta identifikasi isolat bakteri tersebut di atas. Sebanyak (2,4-3,3) x 10 8 cfu/ml inokulum dengan konsentrasi sekitar 9% (v/v) diinokulasikan dalam medium xylan broth, kemudian diinkubasi selama 6 hari pada suhu 30°C, 150 rpm. Pengambilan sampel dilakukan setiap hari dan enzim yang dihasilkan diuji aktivitasnya dengan metode asam dinitro salisilat (DNS). Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas xilanase tertinggi dihasilkan pada hari ke-2 inkubasi, sebesar 5,17 U/ml. Enzim xilanase ini bekerja optimum pada pH 8, suhu 70°C. Penambahan ion logam 10 mM memberikan pengaruh yang bervariasi terhadap aktivitas enzim. Ion Zn 2+ meningkatkan aktivitas xilanase hingga 278,1%. Ion Fe 3+ dan Ca 2+ menurunkan aktivitas xilanase menjadi 75 dan 8,3% relatif terhadap kontrol, sedangkan ion K + tidak memberikan pengaruh terhadap aktivitas xilanase. Hasil identifikasi bakteri menunjukkan bahwa isolat M-13.2A memiliki kemiripan 99% dengan Acinetobacter baumannii. KATA KUNCI: isolate bakteri M-13.2A, identifikasi, xilanase, produksi, karakterisasi ABSTRACT Bacteria isolate designated as M-13.2A from Manado seawater was able to produce cellulase as well as xilanase, based on clear zone formed on specific solid media. This research was intended to obtain further information about production and characterization of xilanase produced by the isolate as well as identification of the M-13.2A isolate. Inoculum with the amount of (2.4–3.3) x 10 8 cfu/ml and 9% (v/v) concentration was inoculated into xylan broth, then incubated for 6 days at the temperature of 30°C, 150 rpm. Sampling was carried out every day and the enzyme produced was assayed their activity using the dinitrosalicylic acid (DNS) method. The result showed that the highest xilanase activity was produced from 2 days fermentation, i.e. 5.17 U/ml. This enzyme worked optimally at the pH of 8, temperature of 70°C. Addition of 10 mM metal ions gave various effect on the enzyme activity. Ions Zn 2+ increased the activity up to 278.1%. Ions Fe 3+ and Ca