In Vitro Culture Manipulation on Pruatjan for Secondary Metabolite Production

Abstract

Purwoceng (Pimpinella pruatjan Molk. atau Pimpinella alpina KDS.) adalah tanaman obat langka yang dapat dimanfaatkan sebagai bahan obat afrodisik, diuretik, dan tonik. Kultur in vitro tidak hanya dapat digunakan untuk konservasi dan perbanyakan tanaman, melainkan dapat juga diterapkan untuk produksi metabolit sekunder. Melalui teknik ini, produksi metabolit sekunder tidak bergantung kepada sumber tanaman di lapang. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk meningkatkan kadar stigmasterol melalui kultur in vitro dengan menggunakan prekursor asam mevalonat. Penelitian dibagi menjadi dua tahap, yaitu induksi kalus dan manipulasi kultur in vitro untuk meningkatkan kadar stigmasterol. Pada tahap induksi kalus, terdapat 16 perlakuan yang merupakan kombinasi perlakuan 2,4-D dan pikloram masing-masing pada taraf 0,5; 1,0; 1,5; dan 2,0 ppm. Untuk meningkatkan kadar stigmasterol, digunakan asam mevalonat pada taraf 0, 250, 500, dan 750 ppm dengan masa inkubasi selama 4 dan 6 minggu. Kandungan stigmasterol dianalisis menggunakan GC-MS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa media P2 (DKW + 2,4-D 0,5 ppm + pikloram 1,0 ppm) adalah media terbaik untuk induksi kalus. Eksplan daun lebih baik daripada eksplan petiol. Hasil analisis GC-MS menunjukkan bahwa kandungan stigmasterol tertinggi (0,0356 ppm) diperoleh dari kalus dengan masa inkubasi 4 minggu pada media dengan penambahan asam mevalonat 250 ppm. Peningkatan taraf asam mevalonat tidak mampu meningkatkan kandungan stigmasterol. Kadar tersebut mirip dengan kandungan stigmasterol pada planlet dari Gunung Putri (0,0365 ppm) dan Dieng (0,0414 ppm). Dibandingkan dengan kadarnya dalam akar tanaman dari lapang, kandungan tersebut sekitar 10-100 kali lipat lebih tinggi.