ПОЛУЧЕНИЕ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ПЕПТИДОВ ИЗ БИОМАССЫ ЛИЧИНОК MUSCA DOMESTICA И ИЗУЧЕНИЕ ИХ СВОЙСТВ

Abstract

Цель исследования – выделение водорастворимых пептидов из биомассы личинок M. domestica и изучение их антимикробной активности. Задачи: подобрать условия высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) для эффективного разделения водорастворимых пептидов, выделить пептиды из биомассы личинок M. domestica, изучить антибактериальную активность. Экстракцию водорастворимых пептидов проводили 0,1 М фосфатно-солевым буфером по разработанной нами оригинальной методике, состоящей из последовательных стадий, таких как перерастворение, центрифугирование и многократное высаливание белков сульфатом аммония. Далее нами были подобраны условия для разделения водорастворимых пептидов методом ВЭЖХ на колонке BioSep SEC S-2000 300x2120 мм при скорости потока 1 мл/мин и длине волны 280 нм, времени хроматографирования 60 мин, объеме вводимой пробы 20 мкл и температуре 25 ºС. Таким образом, нами было получено 6 белковых фракций из биомассы личинок Musca domestica. Наибольший хроматографический выход регистрировали у фракции 5-й, он составил 38,84 %, у 1-й и 2-й фракции – 20,33 и 22,43 % соответственно, у 3-й фракции –11,87 %, в 4-й и 6-й фракциях в следовых количествах – 2,99 и 3,54 % соответственно. Изучена антимикробная активность выделенных белковых фракций и доказано, что фракция № 2 ингибирует рост следующих штаммов микроорганизмов: Bacillus cereusшт. ATCC 11778, Candida albicans шт. РКПГY-401/NCTC-885-653, Staphylococcus aureus шт. ATCC 6538 (209-P); Salmonella typhimurium шт. 1626. Полученные данные являются предпосылкой для разработки антимикробных препаратов на основе АМП.