Detecção de Leifsonia xyli subsp. xyli em mudas pré-brotadas de cana-de-açúcar

Abstract

RESUMO A primeira grande mudança nos últimos anos do setor sucroenergético brasileiro ocorreu quando a colheita mecânica substituiu os cortes manuais de canas queimadas. A segunda transformação começou com a mecanização de materiais de plantio e isso só está sendo possível pelo uso da nova metodologia: mudas pré-brotada (MPB). Para garantir o sucesso desta inovação é fundamental o uso de MPB sadia, especialmente contra a doença raquitismo-das-soqueiras, causada pela bactéria fastidiosa Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx). Esta doença é considerada a mais importante da cultura e o único meio de introdução para novas áreas é o plantio de materiais propagativos contaminados. Portanto, o objetivo deste trabalho foi o de desenvolver um exame diagnóstico para a detecção precoce de Lxx em MPB. No primeiro ensaio, a eficácia de quatro pares de primers (Cxx ITSF # 5/Cxx ITSr # 5, Cxx1/ Cxx2, C2F/C2R, LX23SF/LX23SR) foi examinada para identificar plantas adultas contaminadas com diferentes títulos de Lxx., nas condições originais, bem como em adaptações propostas nesse estudo, as nossas próprias modificações. Para isso foram utilizadas cana-de-açúcar adulta. No segundo ensaio, os dois melhores primers/condições foram testadas em MPB de 45 e 60 dias de idade derivados de materiais contaminados com Lxx. Dados do presente estudo mostraram que o par de primers CXX ITSF # 5/Cxx ITSr # 5 sob nossas modificações foi o mais acurado, uma vez que Lxx foi detectada em todos os 52 MPB de 45 dias originadas de materiais propagativos contaminados com 109 até 106 UFC / mL de Lxx.ABSTRACT The first great change in recent years in the Brazilian sugarcane industry occurred when mechanical harvest replaced manual cuttings of burned canes. The second transformation has started with mechanization of planting materials thanks to new methodology such as presprouted seedcane (MPB in Portuguese). To ensure the success of such innovation, the use of healthy MPB is fundamental, especially against ratoon stunt, caused by Leifsonia xyli subsp. xyli (Lxx). This is considered the most important disease of sugarcane and the only means of introducing it to new areas is by the planting of contaminated propagative materials. Therefore, the aim of this study was to develop a diagnostic assay for early detection of Lxx in MPB. In the first assay, the efficacy of four primer pairs (Cxx ITSf#5/Cxx ITSr#5, Cxx1/Cxx2, C2F/C2R, LX23SF/LX23SR) was examined to identify adult plants contaminated with various titers of Lxx, under original conditions, as well as adapted conditions proposed in this study, our own modifications. Thus, adult sugarcane was used. In the second assay, the two best primers/conditions were tested in 45- and 60-day-old MPB derived from Lxx-contaminated materials. Data of the present study showed that the primer pair CXX ITSF # 5/CxxITSr # 5, under our modification conditions, was the most accurate since Lxx was detected in all 52 MPB aged 45 days from propagative materials contaminated with 109 to 106 CFU/mL.