Técnicas para la determinación de proteínas: inmunofluorescencia y ELISA

Abstract

resumen Las técnicas inmunológicas que utilizan anticuerpos han sido muy empleadas desde su aparición, actualmente son herramientas elementales no sólo para la investigación básica y clínica, sino para el diagnóstico de muchas enfermedades. Esto se debe a su y especificidad y reproducibilidad hacía antígenos por parte de anticuerpos específicos obtenidos de diversas moléculas pequeñas y grandes, muchas de ellas proteínas. Las técnicas de tinción por inmunofluorescencia (IF) y de ensayos de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA por sus siglas en inglés) son parte de estas técnicas im-portantes, por lo que entender sus tipos o variantes que existen y las diferencias entre estas técnicas es básico para utilizarlas adecuadamente y obtener el máximo provecho de cada una de ellas. Estas técnicas junto a la electroforesis de proteínas nos permiten identificar proteínas diferentes en una sola muestra, su localización en un tejido, su presencia o ausencia, también poca o mucha abundancia de la proteína en ese tejido o células. Aquí revisaremos los pasos generales de estas técnicas, sus aplicaciones y los detalles técnicos a considerar si vamos a empezar a trabajar con alguna de ellas. Abstract Immunological techniques that use antibodies have been widely used since their appearance a few decades ago. Currently, these are elementary tools not only for basic and clinical research, but also for the diagnosis of many diseases. This is due to its specificity and reproducibility given by the antigen-antibody interaction, which allows the identification of various small and large molecules, many of them proteins. Immunofluorescence staining (IF) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) techniques are part of these important techniques, so understanding their types or variants that exist and the differences between these techniques is essential to use them properly and get the most out of each of them. These techniques, together with protein electrophoresis, allow us to identify different proteins in a single sample, their location in a tissue, their presence or absence and also their low or high abundance in a tissue or group of cells. Here we will review general steps of these techniques, their applications and the technical details to consider if we are going to start working with them.