Ovine epididymal spermatozoa preservation in liquid state with or without seminal plasma epididimários ovinos

Abstract

ABSTRACT: Preservation and use of spermatozoa that have been recovered after death can extend the use of genetically superior animals. The objective of this study was to evaluate the maximum period for which ovine spermatozoa could be successfully stored in refrigerated dilution medium post-mortem, with or without added seminal plasma. Three samples of spermatozoa collected in an artificial vagina from 10 rams, or from the tails of four epididymes from the same rams at the time of death (G0) and six (G6), twelve (G12), twenty-four (G24) and forty-eight (G48) hours after death were used. After recovery, the spermatozoa were refrigerated at 5°C in either control medium (CM) or control medium plus 20%homologous seminal plasma (SP) and evaluated for 72 hours from the start of refrigeration. The G48 samples had a lower(P <0.05) total motility (TM) and plasma membrane integrity in the hyposmotic test (HOST) than the other groups evaluated at all analyzed times. The TM decreased (P <0.05) after 24 hours of cooling in semen collected in AV, at G0 and G24 and after 48 hours of refrigeration in G6 and G12. The TM and HOST integrity and sperm morphology did not differ between samples refrigerated in CM or SP. In conclusion, it is possible to collect epididymal spermatozoa up to 24 hours after death. Sperm viability can be prolonged fora further 48 hours by refrigeration. However, total motility decreases from 24 hours after refrigeration and the supplementation of 20% seminal plasma to the extender has no effect on spermatozoa longevity.RESUMO: A recuperação e preservação dos espermatozoides após a morte possibilita maior aproveitamento de animais geneticamente superiores. O objetivo deste trabalho foi avaliar o período máximo após a morte do carneiro para que os espermatozoides possam ser refrigerados em meio diluidor com ou sem plasma seminal. Foram utilizadas três amostras de espermatozoides colhidos em vagina artificial (AV) de 10 carneiros ou da cauda de quatro epidídimos provenientes dos mesmos carneiros no momento da morte (G0) e seis (G6), doze (G12), vinte e quatro (G24) e quarenta e oito (G48) horas após a morte. Após a recuperação os espermatozoides (em AV ou cauda do epidídimo) foram refrigerados à 5°C em dois tratamentos: meio controle (CM) ou meio controle acrescido de 20% de plasma seminal homólogo (SP) e avaliados até 72 horas após o início da refrigeração. As amostras do G48 apresentaram motilidade total (TM) e integridade de membrana plasmática no teste hiposmótico (HOST) menor (P<0,05) que os outros grupos avaliados em todos os momentos estudados. TM diminuiu (P<0,05) após 24 horas de refrigeração no sêmen colhido em AV, no G0 e G24 e a partir de 48 horas de refrigeração no G6 e G12. A TM, integridade de membrana no HOST e morfologia espermática não diferiram entre as amostras refrigeradas em CM ou SP. Contudo, é possível refrigerar espermatozoides epididimários até 24 horas post mortem, a refrigeração prolonga a viabilidade espermática até 48 horas após o início da refrigeração. A adição de 20% de plasma seminal ao meio diluidor não tem efeito sobre a longevidade espermática.