LECTINA LIGADORA DA MANOSE: PROPRIEDADES, ISOLAMENTO E PURIFICAÇÃO

Abstract

A lectina ligadora de manose (MBL) é uma proteína encontrada no soro humano, secretada pelo fígado e dependente de cálcio. A MBL é um importante elemento do sistema imune inato, que pode atuar por meio da ativação do sistema do complemento pela via das lectinas e por sua característica de opsonina, facilitando a fagocitose dos patógenos. Esta proteína está associada a doenças infecciosas e auto-imunes, com interferência tanto na susceptibilidade quanto na severidade das patologias. O objetivo deste trabalho foi isolar e purificar a MBL do soro humano, por meio de cromatografia, para uma futura produção de anticorpos monoclonais. O método utilizado para separar e isolar a proteína do pool de soro foi cromatografia por afinidade, realizada em coluna. O protocolo do método foi desenvolvido durante a execução deste trabalho, com base em informações de estudos realizados e publicados anteriormente. Neste estudo, foram utilizadas colunas de diferentes dimensões e a fase estacionária constituiu-se de gel Sepharose 6B-D-manose. As frações obtidas na cromatografia foram submetidas à análise espectrofotométrica, considerando a absorbância como critério de verificação da presença da MBL na amostra. A solução de proteína resultante da separação cromatográfica foi concentrada para permitir a execução da próxima etapa, a identificação por eletroforese. O resultado da eletroforese indicou que a proteína isolada é a MBL. O método cromatográfico desenvolvido neste trabalho mostrou-se eficaz para isolar e purificar a MBL; entretanto, ainda são necessários ajustes para aprimorar o método, a fim de aumentar a rapidez e o rendimento.