Alterations of T cell receptor Vβ repertoire of CD8 T lymphocytes in immune tolerance induction in two hemophilia A patients with inhibitors

Abstract

Background/Aim. Hemophilia A patients with inhibitors are treated effectively with immune tolerance induction (ITI) therapy. Although anti-idiotypic antibodies may play a certain role in the underlying mechanism, the detailed mechanism by which ITI produces a curative effect remains unknown. The aim of this study was to clarify the immunological aspect of ITI. Methods. Longitudinal T-cell receptor (TCR) analysis was performed during ITI. TCR variable region ?-chain and ?-chain repertoires were serially analyzed for peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), CD4 T cells, and CD8 T cells from 2 hemophilia inhibitor patients treated with ITI (Patients 1 and 2). Furthermore, to see whether skewing observed in TCR analysis resulted from clonality alterations, T-cell clonality was investigated using complementarity-determining region 3 (CDR3) size spectratyping. Results. In the patient 1, inhibitor titer remained to be 19.6 BU/mL for 596 days after ITI commencement, and ITI was unsuccessful. In the patient 2, inhibitor titer disappeared 434 days after ITI commencement, and ITI was successful. In both cases, skewing of TCR variable region ?/?-chain repertoires was observed in CD8 T cell subset, whereas not in CD4 T cell subset. Conclusion. Alteration of TCR repertoires, especially TCR variable region ?-chain repertoire of CD8 T cells, was distinct between successful and unsuccessful cases, suggesting that immunological response in the early phase affected the ITI outcomes.Uvod/Cilj. Oboleli od hemofilije A sa prisutnim inhibitornim antitelima uspesno se lece terapijom zasnovanom na indukciji imunoloske tolerancije (ITI). Iako, antiidiotipska antitela mogu imati odredjenu ulogu u osnovnom mehanizmu ovog procesa, detaljni mehanizmi kojim ITI ostvaruje terapijski efekat su i dalje nepoznati. Cilj ove studije bio je da se razjasne imunoloski aspekti ITI terapije. Metode. Longitudinalna analiza repertoara T-celijskog receptora (TCR) izvrsena je tokom ITI terapije. Repertoari promenljivog regiona ?- i ?-lanca TCR-a analizirani su serijski u populaciji mononuklearnih celija periferne krvi, CD4 T-celija i CD8 T-celija kod dva bolesnika sa hemofilijom A i prisutnim inhibitorima, koji su leceni primenom ITI terapije (bolesnici 1 i 2). Takodje, ispitivana je klonalnost T-limfocita koriscenjem metode tipiziranja spektra fragmenata regiona 3 koji odredjuje komplementarnost (CDR3) sa ciljem da se utvrdi da li je skretanje u TCR repertoaru posledica promene klona. Rezultati. Kod bolesnika 1 titar inhibitornih antitela zadrzao je vrednost od 19,6 BU/mL tokom 596 dana od zapocinjanja ITI terapije, na osnovu cega je zakljuceno da je ITI terapija bila bezuspesna. Kod bolesnika 2 ITI terapija je bila uspesna jer je titar inhibitornih antitela iscezao posle 434 dana od pocetka terapije. Kod oba bolesnika skretanje TCR repertoara promenljivog regiona ?- i ?-lanca TCR-a uocen je u podgrupi CD8 T celija, ali ne i u podgrupi CD4 T-celija. Zakljucak. Promena repertoara TCR-a, posebno promenljivog regiona ?-lanca TCR-a u CD8 T-celija bila je razlicita kod uspesno i neuspesno lecenih bolesnika, sto ukazuje da je imunoloski odgovor u ranoj fazi uticao na ishod ITI terapije.