IDENTIFIKASI DNA DAN PENETAPAN KADAR PROTEIN PADA DAUN JERUK LIMAU (Citrus amblycarpa)

Abstract

Abstrak Daun jeruk limau (Citrus amblycarpa) memiliki potensi sebagai bahan pengobatan infeksi kulit. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi kandungan DNA dan protein dalam daun jeruk limau menggunakan metode PCR dan elektroforesis gel. Metode yang digunakan mencakup isolasi DNA dengan buffer ekstraksi dan CTAB, amplifikasi DNA dengan PCR, serta elektroforesis gel untuk analisis DNA. Isolasi dan purifikasi protein dilakukan dengan metode salting out, dan konsentrasi protein dianalisis menggunakan metode Bradford. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kemurnian DNA pada dua sampel berturut-turut adalah 0,635 nm dan 1,721 nm, dengan sampel kedua memenuhi standar kemurnian (1,7-1,9 nm). Proses PCR berhasil menggandakan segmen DNA target, namun elektroforesis hanya menunjukkan DNA ladder tanpa band DNA daun jeruk limau, kemungkinan akibat kontaminasi atau degradasi DNA. Analisis protein menggunakan metode Bradford menghasilkan kurva standar dengan persamaan y = 0,0029x + 0,6016 (R² = 0,9489). Kadar protein pada tiga sampel berturut-turut adalah 564,38 ng/μl, 563,66 ng/μl, dan 563,34 ng/μl, dengan rata-rata 563,79 ng/μl, yang berada dalam rentang normal (400-700 ng/μl). Penelitian ini memberikan dasar ilmiah untuk pengembangan daun jeruk limau sebagai bahan aktif farmasi. Kata Kunci : Citrus amblycarpa, isolasi DNA, PCR, elektroforesis gel, isolasi protein, metode bradford Abstract Lime leaves (Citrus amblycarpa) have the potential as a treatment for skin infections. This study aims to identify the DNA and protein content in lime leaves using PCR and gel electrophoresis methods. The methods used include DNA isolation with extraction buffer and CTAB, DNA amplification with PCR, and gel electrophoresis for DNA analysis. Protein isolation and purification were carried out using the salting out method, and protein concentration was analyzed using the Bradford method. The results showed that the purity of DNA in two consecutive samples was 0.635 nm and 1.721 nm, with the second sample meeting the purity standard (1.7-1.9 nm). The PCR process successfully duplicated the target DNA segment, but electrophoresis only showed a DNA ladder without a lime leaf DNA band, possibly due to contamination or DNA degradation. Protein analysis using the Bradford method produced a standard curve with the equation y = 0.0029x + 0.6016 (R² = 0.9489). The protein levels in the three samples were 564.38 ng/μl, 563.66 ng/μl, and 563.34 ng/μl, respectively, with an average of 563.79 ng/μl, which is within the normal range (400-700 ng/μl). This study provides a scientific basis for the development of lime leaves as an active pharmaceutical ingredient.