Uso de membranas bacterianas como fuente para la elaboración de liposomas como adyuvantes

Abstract

RESUMEN La formulación de liposomas como adyuvantes a partir de membranas interna (MI) y externa (ME) de bacterias Gram(-) permite estimular al sistema inmune ya que incorporan patrones moleculares asociados a microorganismos (MAMPs) en su estructura, facilitando el reconocimiento de células presentadoras de antígeno como células dendríticas y macrófagos. Para la obtención de los liposomas, se utilizó la cepa de Escherichia coli (JM109) y posterior a un proceso de solubilización con detergentes se pudo extraer diferencialmente ambas membranas. La formación de los liposomas se produjo por la diálisis continua a la que se sometió la muestra. Los liposomas fueron evaluados en cuanto a tamaño, características físicoquímicas y eficiencia de incorporación de un antígeno en su estructura. Los liposomas generados de MI y ME incluyen MAMPs, miden 200 nm aproximados, presentan carga negativa e incorporan una proteína antigénica con un porcentaje de eficiencia variable siendo mayor en los producidos a partir de la MI. Palabras claves: liposomas, membranas interna y externa, MAMPs, adyuvantes. 1. Introducción La principal herramienta que permite detener la invasión de microorganismos patógenos en las distintas especies de origen animal es la vacunación. Los protocolos de vacunación tienen por objeto la presentación de antígenos exógenos a células presentadoras de antígeno (CPA) asociado a un adyuvante que potencie la presentación antigénica y que genere la consecuente activación de linfocitos T y B (Heit et al., 2008). La producción de anticuerpos neutralizantes (inmunidad humoral) y la activación de importantes poblaciones de células T (inmunidad celular) son la clave del éxito terapéutico, para lo cual es necesaria la completa activación de las CPA (Mescher et al., 2006). Las células de la inmunidad innata que controlan el proceso de presentación antigénica son las células dendríticas (CD) y tienen un rol crucial en la activación de células T, pudiendo controlar parte importante de la inmunidad adaptativa en respuesta a la internalización y procesamiento de antígenos a través de la vía de moléculas de histocompatibilidad clases I y II (MHC I y MHC II) y la presentación de péptidos antigénicos a los linfocitos T CD4+ y CD8+ (Reddy et al., 2006). Las señales coestimuladoras necesarias para la diferenciación de la respuesta inmune adaptativa se activan cuando las CD interactúan con patrones moleculares asociados a microorganismos (MAMPs, del inglés Microorganism Associated Molecular Pattern) es decir, estructuras altamente conservadas que están presentes en la mayoría de los microorganismos, incluidos los patógenos. Los MAMPs tienen múltiples efectos en las señales generadas por las células del sistema inmune innato y, por lo tanto, pueden ser útiles como adyuvantes