Validasi Metode Pengukuran Kadar Total Flavonoid dalam Ekstrak Etanol Sirih Merah (Piper crocatum var. Ruiz & Pav) Menggunakan Nano Spektrofotometer BMG Lab. Tech.

Abstract

Method validation is a crucial step when an analytical method is applied using different instruments to ensure the accuracy, precision, and reliability of the results. This study aimed to validate the method for determining the total flavonoid content in the 70% ethanol extract of red betel leaves (Piper crocatum) using a BMG LAB.TECH nanospectrophotometer equipped with a 96-well plate. This method offers advantages in terms of time efficiency and sample volume compared to conventional spectrophotometric techniques. The validation parameters assessed included linearity, precision, accuracy, limit of detection (LoD), and limit of quantitation (LoQ). The results demonstrated excellent linearity with a correlation coefficient (r) of 0.997. Precision testing yielded a relative standard deviation (%RSD) of 2.65%, while accuracy testing showed an average recovery rate of 104.33%. The LoD and LoQ were calculated to be 4.06 ppm and 13.52 ppm, respectively. Based on these findings, the total flavonoid content in the ethanol extract of the red betel leaves was determined to be 24.30 mg QE/g. Because the method meets the validation criteria outlined in the ICH guidelines, it is considered valid and suitable for use in educational laboratory activities and scientific research applications.. Abstrak Validasi metode merupakan hal penting yang harus dilakukan ketika suatu metode analisis menggunakan instrumen yang berbeda untuk menjamin akurasi, presisi, dan keandalan hasil pengukurannya. Penelitian ini bertujuan untuk memvalidasi metode pengukuran kadar total flavonoid dalam ekstrak etanol 70% daun sirih merah (Piper crocatum) menggunakan spektrofotometer nano BMG LAB.TECH yang dilengkapi pelat 96-well. Metode ini dinilai lebih efisien dalam hal waktu analisis dan volume sampel yang digunakan dibandingkan dengan spektrofotometer UV-Vis biasa. Parameter validasi yang diuji yaitu linearitas, presisi, akurasi, limit deteksi (LoD), dan limit kuantitasi (LoQ). Hasil pengujian menunjukkan bahwa metode ini memiliki linearitas yang sangat baik dengan koefisien korelasi (r) sebesar 0,997. Uji presisi menghasilkan nilai persentase simpangan baku relatif (%RSD) sebesar 2,65% dan uji akurasi menunjukkan rata-rata persen perolehan kembali (recovery) sebesar 104,33%. Nilai LoD dan LoQ masing-masing sebesar 4,06 ppm dan 13,52 ppm. Berdasarkan hasil tersebut, kadar flavonoid total dalam ekstrak etanol sirih merah diperoleh sebesar 24,30 mg QE/g. Dengan memenuhi kriteria nilai validasi berdasarkan pedoman ICH, maka metode ini dinyatakan valid dan dapat diterapkan dalam kegiatan praktikum maupun penelitian di laboratorium.